МЕТОДИКИ ПРИМЕНЕНИЯ ИНДИКАТОРНОЙ БУМАГИ
1. Методика количественной оценки КОЕ в смывах с оборудования.
1.1 В соответствии с «Инструкцией по микробиологическому контролю на предприятия молочной промышленности» пп. 2.8, 2.19, стерильным тампоном берется проба с площади 100 кв. см. исследуемой поверхности.
1.2 Тампон опускается в пробирку, содержащую 10 куб. см стерильного физиологического раствора.
1.3 В эту пробирку на 1-2 секунды окунается полоска индикаторной бумаги для определения кишечной палочки. Затем полоска вынимается, излишек влаги удаляется путем прикосновения полоски к стенке пробирки.
1.4 Полоска помещается в свой пакет. Пакет запаивается и помещается для инкубации в термостат с температурой 37 градусов Цельсия.
1.5 После 12-18 часов инкубации пакет с полоской вынимается из термостата и производится подсчет числа N цветных пятен на полоске.
1.6 Так как полоска впитывает 0.5 см. куб. влаги, то для получения числа M колоний-образующих единиц (КОЕ) в 1 куб. см число пятен N следует умножить на 2:
M =2*N.
1.7 Учитывая, что в пробирке изначально находилось 10 куб. см раствора, а найденное число M соответствует 1 куб. см, чтобы найти полное число K КОЕ в пробирке, необходимо число M умножить на 10:
K = 10*M
1.8 Полученное число КОЕ соответствует площади 100 кв. см.
1.9 Чтобы получить количество Q КОЕ на 1 кв. см. площади, число K следует поделить на 100.
Q = K/100
То же самое число Q КОЕ на 1 кв. см исследуемой площади можно получить, поделив количество N пятен на полоске на число 5.
Q = K/100 = 10*2*N/100 = N/5
Пример: В результате подсчета пятен на полоске индикаторной бумаги, получилось число 25.
Количество Q КОЕ на 1 кв. см исследуемой поверхности равно Q = N/5 = 5
2. Методика количественной оценки КОЕ в разведениях молочных продуктов.
2.1 Делается первое разведение молочного продукта. При этом 10 куб. см. продукта разводится в 90 см. куб. физ. раствора, помещенного в мерный цилиндр.
2.2 Делается второе разведение молочного продукта. При этом 1 куб. см. тщательно размешанного раствора из мерного цилиндра разводится в 9 куб. см физ. раствора, помещенного в пробирку.
2.3 В эту пробирку на 2-3 секунды окунается полоска индикаторной бумаги для определения кишечной палочки. Затем полоска вынимается, излишек влаги удаляется путем прикосновения полоски к стенке пробирки.
2.4 Полоска помещается в свой пакет. Пакет запаивается и помещается для инкубации в термостат с температурой 37 градусов Цельсия.
2.5 После 12-18 часов инкубации пакет с полоской вынимается из термостата и производится подсчет числа N цветных пятен на полоске.
2.6 Так как полоска впитывает 0.5 куб см. влаги, то для получения числа M КОЕ в 1 куб. см раствора в пробирке, число пятен N следует умножить на 2:
M =2*N.
2.7 Учитывая, что в пробирке изначально находилось 10 куб. см раствора, а найденное число M соответствует 1 куб. см, чтобы найти полное число K КОЕ в пробирке, необходимо число M умножить на 10:
K = 10*M
Полученное число K – это количество КОЕ в 1 куб. см. раствора из цилиндра, так как в 10 куб. см. пробирке содержится 1 куб. см. раствора из цилиндра.
2.8 Находим число R КОЕ в цилиндре, умножив число K на 100:
R = K*100
2.9 Полученное число R КОЕ в цилиндре соответствует 10 куб. см молочного продукта. Таким образом, число Q КОЕ в 1 куб. см продукта получится делением числа R на 10:
Q= R/10= 2*N*10*100/10=200*N
Чтобы получить число Q КОЕ в 1 куб. см продукта, следует число пятен N на полоске умножить на 200.
Пример: В результате подсчета пятен на полоске индикаторной бумаги, получилось число 3.
Число Q бактерий в 1см. куб. молочного продукта равно количеству бактерий в пробирке, и будет равно Q = 200*N = 600
Иллюстрация: Полоска индикаторной бумаги и результат ее применения: обнаруженные после 15 часов инкубации колонии бактерий группы кишечной палочки (БГКП):
Посмотрите, пожалуйста, подготовленный нашими дилерами фильм-инструкцию на RUTUBE:
#БГКП
#Экспресс
#Тест
#кишечная
#Микробиолог
#смывы
|